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嘔吐毒素的檢測(cè)方法與作用機(jī)制

  • 發(fā)布日期:2018-07-09      瀏覽次數(shù):3460
    • 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)又稱嘔吐毒素(vomitoxin),主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種。

      嘔吐毒素

       

      DON的主要產(chǎn)生菌是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum),據(jù)報(bào)道也有其它一些鐮刀菌可產(chǎn)生 。DON于1972年由日本的Morooka等分離,同年,Yoshizawa等闡明了這種新的真菌毒素的結(jié)構(gòu),并將其命名為4-deoxynivalenol(DON) 。

       

      DON廣泛存在于,主要污染小麥、大麥、玉米等谷類(lèi)作物,也污染糧食制品,人和動(dòng)物在誤食被該毒素污染的糧谷類(lèi)后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng)。另外,它還常與其它的霉鹵毒素如黃曲mei毒素共同污染農(nóng)作物,進(jìn)入人體后可以相互影響。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)DON可能與人類(lèi)食管癌、IGA腎bing有關(guān),對(duì)人類(lèi)及動(dòng)物的健康構(gòu)成威脅。DON屬于劇毒或中等毒物,研究表明,DON在體內(nèi)可能有一定的蓄積,但無(wú)特殊的靶器官,具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性。人畜攝入了被DON污染的食物/飼料后,會(huì)導(dǎo)致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀,嚴(yán)重時(shí)損害造血系統(tǒng)造成死亡,但不同的動(dòng)物對(duì)DON的敏感程度不一,豬是敏感的動(dòng)物。研究表明,DON可能對(duì)免疫系統(tǒng)有影響,有明顯胚胎毒性和一定致畸作用,可能有遺傳毒性,但無(wú)致癌、致突變作用。由于DON的危害嚴(yán)重,引起了各國(guó)的普遍重視。

       

      有調(diào)查顯示:

       

      中國(guó)飼料和原料霉菌毒素污染超標(biāo)的比例為60%—70%,其中嘔吐毒素的超標(biāo)比例接近70%,被檢的玉米、麩皮和DDGS樣品中嘔吐毒素的檢出率均高達(dá)90%以上,分別為92.9%、92.3%和100%。

       

      豆粕的檢出率較低為54.5%。

       

      麩皮和豆粕中嘔吐毒素未見(jiàn)超標(biāo),其平均含量為0.44mg/kg和0.05mg/kg,屬于輕度污染。

       

      玉米嘔吐毒素的超標(biāo)率為57.1%,毒素平均含量為1.01mg/kg,其中*含量為2.13mg/kg,屬于中度污染。

       

      DDGS中嘔吐毒素的超標(biāo)率為88.2%,毒素平均含量為1.36mg/kg,低含量為0.85mg/kg,*含量為1.72mg/kg,屬于中度污染。

       

      玉米和DDGS中嘔吐毒素的平均含量極顯著高于麩皮和豆粕(P<0.01),DDGS中嘔吐毒素的平均含量顯著高于玉米(P<0.05),麩皮中嘔吐毒素的平局你含量極顯著高于豆粕(P<0.01)。

       

      被檢配合飼料中嘔吐毒素的檢出率為97.4%,仔豬料、中豬料、妊娠母豬料和哺乳母豬料的檢出率高達(dá)100%。

       

      其中,乳豬料嘔吐毒素未見(jiàn)超標(biāo),其平均含量為0.28mg/kg,顯著低于其他種類(lèi)全價(jià)料(P<0.05),屬于輕度污染。仔豬料、中豬料、大豬料、妊娠豬料和哺乳豬料均有不同程度的超標(biāo),超標(biāo)率為14.3%、14.3%、22.2%、10.0%和23.1%,其*含量分別為2.31、1.14、1.44、1.45mg/kg和1.52mg/kg,屬于中度污染。

       

      “嘔吐毒素”不怕高溫126℃下加熱90分鐘仍有毒性。

       

      蠟樣芽孢桿菌是一種在顯微鏡下看起來(lái)形狀像蠟一樣的革蘭染色陽(yáng)性桿菌,在自然界廣泛存在,是引起食物中毒的常見(jiàn)細(xì)菌,與臭名昭著的炭疽桿菌是“同族兄弟”。

       

      蠟樣芽孢桿菌很狡猾,在生長(zhǎng)條件不好的情況下會(huì)產(chǎn)生一種被稱為“芽孢”的“外殼”,把自己保護(hù)起來(lái),避免死亡。因此,蠟樣芽孢桿菌比其它細(xì)菌更耐熱,常常在加熱的條件下也不會(huì)死亡。

       

      上世紀(jì)70年代以前,人們并未注意到蠟樣芽孢桿菌對(duì)人類(lèi)健康的影響,以為只是一種自然界常見(jiàn)的非致病菌。但實(shí)際上,早在1937年就有人從病人的血液中分離到了這種細(xì)菌;上世紀(jì)50年代,挪威醫(yī)生首先報(bào)告了蠟樣芽孢桿菌引起的4起食物中毒事件,涉及600多人。后來(lái),英國(guó)、日本、印度、澳大利亞、美國(guó)等地相繼發(fā)現(xiàn)蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒,我國(guó)于1973年報(bào)道蠟樣芽孢桿菌相關(guān)病例。近年來(lái),蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒事件逐漸增多。據(jù)統(tǒng)計(jì),1986年-2007年僅在我國(guó)文獻(xiàn)報(bào)道中的蠟樣芽孢桿菌食物中毒事件就有299起,甚至有導(dǎo)致死亡的病例發(fā)生。

       

      “米”家族易被盯上

       

      蠟樣芽孢桿菌釋放何種毒素與細(xì)菌的類(lèi)型和生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)。有研究證實(shí),血清1型蠟樣芽孢桿菌容易釋放嘔吐毒素;在米飯等淀粉類(lèi)食物中,蠟樣芽孢桿菌容易產(chǎn)生嘔吐毒素,而在肉類(lèi)等其它食品中,嘔吐毒素產(chǎn)生較少,而腸毒素增多。

       

      一般來(lái)說(shuō),壞了的食品總是有異味,大家聞一聞就知道能不能吃,但蠟樣芽孢桿菌“放毒”特別隱蔽,含有毒素的食品大多無(wú)腐*、變質(zhì)現(xiàn)象,進(jìn)食時(shí)不易被人們察覺(jué)。蠟樣芽孢桿菌食物中毒主要發(fā)生在夏季,在我國(guó)主要發(fā)生在6-9月。食物中毒的臨床表現(xiàn)有兩種類(lèi)型:嘔吐型和腹瀉型。我國(guó)以嘔吐型多見(jiàn),約占蠟樣芽孢桿菌食物中毒的76%,而歐美等西方國(guó)家以腹瀉型多見(jiàn)。這可能與我國(guó)的飲食結(jié)構(gòu)有關(guān)。

       

      嘔吐型的蠟樣芽孢桿菌食物中毒潛伏期短,一般在進(jìn)食后0.5-6小時(shí)發(fā)生,主要表現(xiàn)為惡心、嘔吐,伴有乏力、低熱等癥狀,很少出現(xiàn)腹瀉。大多數(shù)病情較輕,24小時(shí)內(nèi)可以自愈,但嚴(yán)重的可能引起肝衰竭、代謝性酸中毒、心肌或中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害,甚至導(dǎo)致死亡。引起嘔吐型食物中毒的主要食品是米飯及其制品(80%以上),如:米飯、炒飯、稀飯、米糕、米粉皮、米線等;涼面、豆腐也可以引發(fā)。

       

      腹瀉型食物中毒較少見(jiàn),中毒的原因是蠟樣芽孢桿菌腸毒素。潛伏期較長(zhǎng),一般在進(jìn)食后6-15小時(shí)發(fā)生,臨床表現(xiàn)主要是水樣腹瀉和腹痛,很少伴有嘔吐癥狀。大多數(shù)在腹瀉數(shù)次后癥狀逐漸減輕,1天左右好轉(zhuǎn)。嚴(yán)重者可引起電解質(zhì)紊亂、出血性腹瀉。引起腹瀉型食物中毒的食品較復(fù)雜,糧食、肉類(lèi)、乳類(lèi)食品均可引發(fā),其中盒飯類(lèi)混合食品較多見(jiàn),可能是在分裝的過(guò)程中污染所致。

       

      嘔吐毒素檢測(cè)方法:

       

      1、膠體金定性卡法:

      是嘔吐毒素簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法,檢測(cè)不需要配套儀器,樣品處理簡(jiǎn)單,五到十分鐘就可以看到檢測(cè)結(jié)果。可以根據(jù)G、T線,初步確定所測(cè)樣本毒素含量范圍,但不能給出具體數(shù)值。價(jià)*低、沒(méi)有國(guó)標(biāo)支持,適合企業(yè)初檢使用。

       

      2、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法:

      依據(jù)該方法開(kāi)發(fā)出來(lái)的嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒,可以半定量的檢測(cè)樣品中嘔吐毒素的含量,目前國(guó)產(chǎn)試劑盒大量上市,價(jià)*適中,有國(guó)標(biāo)支持,適合中小型企業(yè)質(zhì)量控制,或者作為產(chǎn)品初步質(zhì)量控制。

       

      3、免疫親和柱為分離手段:用液相色譜儀作為檢測(cè)工具的分析方法。該項(xiàng)技術(shù)靈敏度高,測(cè)定范圍廣泛,采用單克隆免疫技術(shù),可以性地將嘔吐毒素和其他真菌毒素分離出來(lái),分離效率和回收率高,正確性和可靠性強(qiáng),有國(guó)標(biāo)支持。檢測(cè)成本高,儀器維護(hù)成本高。一般作為檢測(cè)機(jī)構(gòu)終端判定方法,也有大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制方法。

       

      4、膠體金定量分析卡法:是深圳市芬析儀器制造有限公司推出的光譜掃描吸峰方法,靈敏度高、結(jié)果可靠,可以和親和柱方法相媲美,檢測(cè)價(jià)*適中;有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)支持。適合中大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制。

       

      5、液相或氣相串聯(lián)質(zhì)譜法:一般作為實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方法,主要作為研究或者國(guó)家部門(mén)對(duì)毒素情況監(jiān)測(cè)、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

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