熒光微球的免疫層析法快速檢測黃曲霉毒素B1

熒光微球的免疫層析法快速檢測黃曲霉毒素B1

檢測原理：應用時間分辨熒光競爭抑制免疫層析的原理，當將樣品滴加在加樣區(qū)時，樣品中的待測物與結合墊中的熒光微球標記抗體結合并通過毛細作用向前層析，當達到檢測區(qū)后，檢測線 T 線上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標記抗體結合，檢測線 T 線上結合的熒光微球標記抗體的量與樣品中待測物的量成反比，質(zhì)控線 C 線結合的熒光標記物樣品中待測物的量無關，其它熒光標記物繼續(xù)層析達到吸收區(qū)。層析結束后，用CSY-YG701讀取 T 線和 C 線的熒光強度并計算 T/C 值，通過儀器內(nèi)置的標準曲線即可計算出樣品中待測物的含量。

 

一、實驗所需器皿準備

1、CSY-YG701黃曲霉毒素熒光定量檢測儀（深圳市芬析儀器制造有限公司）

2、電子天平（國產(chǎn)）

3、離心機（國產(chǎn)）

3、粉粹機（國產(chǎn)）

4、渦旋振蕩器（國產(chǎn)）

5、可調(diào)移液器1000-5000ul 可調(diào)移液器 20-200ul（國產(chǎn)）

 

二、樣品前處理

1、準確稱取2.0g粉碎均勻的谷物樣本，放入50ml離心管或者錐形瓶中，加入10ml樣品提取液，用旋渦振蕩器震蕩3分鐘混勻，混勻后即為樣品液。

2、混勻后，取1.5ml均勻的樣品液在離心管，并在3500轉(zhuǎn)以上離心5分鐘。

3、取離心液上清液200ul+1000ul樣品提取液震蕩5秒混勻即為待測液。

 



 

三、樣品檢測

1、開始檢測：取60ul待測液+60ul熒光標記物,放入新的離心管中，把移液器刻度調(diào)至90ul，然后在離心管中吸吐3次液體（避免氣泡出現(xiàn)），混勻之后取90ul滴入檢測卡內(nèi)（本步驟應該在30s內(nèi)完成），滴入完成之后，立即將檢測卡放入恒溫孵育器內(nèi)孵育8分鐘后進行檢測。